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目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增的靶基因和特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了用SYBR GreenⅠ多重荧光定量PCR熔解曲线来检测多种致病菌的方法。结果该方法检测的菌液灵敏度分别是沙门菌168 CFU/ml,志贺菌136CFU/ml,金黄色葡萄球菌1240CFU/ml,特异性强,整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。
Abstract：1 JOTHIKUMAR N,WANG X,GRIFFITHS M W.Real-time multiplex SYBR green I-based PCR assay forsimultaneous detection of Salmonella serovars andListeria mon℃ytogenes[J].J Food Prot,2003,66:2141–2145.
2贝峰,周升扬,王超,等.多重荧光PCR检测肠出血性大肠杆菌(VTEC)方法的研究[J].中国农学通报,2007,23(6):37-41.
3 REISCHL U,YOUSSEF M T,WOLF H,et al.Real-time fluorescence PCR assays for detection andcharacterization of heat-labile I and heat-stable Jenterotoxin fenes from enterotoxigenic Escherichia coli[J].J Clin Microbiol,2004,42:4092-4100.
4夏成静,黄烈,陆学东,等.SYBR Green I实时荧光定量多重PCR快速筛查葡萄球菌中常见大环内酯类耐药基因[J].现代检验医学杂志,2008,23(6):30-34.
基本信息:
DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2012.02.021
中图分类号:R155.5
引用信息:
[1]陈萍,魏琼,史艳宇,等.多重荧光定量PCR检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌[J].卫生研究,2012,41(02):256-259.DOI:10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2012.02.021.
基金信息:
吉林省科技厅资助项目(No.20090948)
2012-03-30
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