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溴氰菊酯染毒大鼠的脑组织中GCS亚单位和Nrf2表达的时间进程

目的研究溴氰菊酯(DM)对大鼠大脑皮层和海马组织γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GCS)轻亚单位(GCSl)和重亚单位(GCSh)mRNA表达,以及GCSh和转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)基因蛋白表达时间进程的影响。方法DM染毒组(DM12·50mg/kg bw)和溶剂对照组大鼠染毒1次,分别于大鼠染毒后不同时间点处死大鼠,分离皮层和海马。用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测定mRNA表达的相对量。联合用免疫组织化学方法和图像分析系统检测海马和大脑皮层中GCS重亚单位蛋白(GCS-HS)和Nrf2蛋白的水平。结果(1)DM染毒后第5h和第48h大鼠大脑皮层中GCSh mRNA相对水平分别降低至对照组的83·9%、86·0%(P<0·05),第5h、24h和48h Nrf2mRNA分别增高至0h对照组的146·4%、145·2%和147·9%(P<0·05)。(2)DM染毒后第5h和24h海马中GCSh mRNA相对水平分别增高至0h对照组的118·4%、118·4%(P<0·05),第5h海马中GCSl mRNA比0h对照组、24h和48h组均高,增高至对照组的121·4%(P<0·05)。DM染毒后各时间点海马Nrf2mRNA水平未见明显的变化(P>0·05)。(3)DM染毒后海马不同分区(CA1、CA2、CA3和齿状回)和大脑皮层中的GCS催化亚单位(GCS-HS)和转录因子Nrf2蛋白水平均未见明显改变。结论本实验条件下DM染毒后,大鼠海马GCSh和GCSl mRNA基因表达出现上调,而脑皮层GCSh基因表达出现下调,Nrf2mRNA水平表达出现上调,但海马和皮层组织中的GCS-HS和Nrf2蛋白水平未见显著变化。

p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖及其胎仔发育的影响

目的研究p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖和胎仔发育的影响。方法对孕12~14天小鼠每天联合灌胃不同剂量的p,p’-DDE和β-BHC(各1、5、10mg/kg bw),并设植物油溶剂对照组,采用磁性分离酶联免疫法检测孕鼠血清雌二醇(E2)和孕酮(P)含量,RT-PCR检测小鼠胎盘组织中雌激素受体(α-ER)、促性腺激素释放激素(GnRH)和β-内啡肽(β-EP)mRNA表达水平。结果①生殖影响:随染毒剂量加大母鼠子宫剥离重和子宫腔内液增加,子宫着床数减少,胎仔肛殖距和雌雄比增加,孕鼠血清中雌二醇和孕酮水平上升,胎盘组织α-ER和GnRHmRNA表达上调而β-EP mRNA表达下调,且均呈现剂量依赖性关系,差异有显著性(P<0·05)。②发育影响:随染毒剂量增加孕鼠体重增长减少,肝脏的脏器系数增加,活胎数下降,不良妊娠结局(死胎、吸收胎和畸形数)增多,雌胎数所占比例加大,均呈剂量效应关系,差异有显著性(P<0·05)。结论p,p’-DDE和β-BHC可干扰孕小鼠生殖功能,导致生殖和发育障碍,造成雌雄比例失衡。

血清及脑组织中单胺类神经递质高效液相色谱电化学检测方法研究

目的建立一种快速准确测定大鼠血清及脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量的高效液相色谱-电化学检测方法。方法采用ODS柱,流动相为缓冲液(0·02mol/L柠檬酸三钠和0·05mol/L磷酸氢二钠)∶甲醇=85∶15的溶液,流速1·0ml/min。结果四种神经递质保留时间的RSD在0·29%~0·67%之间、峰面积RSD在0·09%~0·36%之间,重现性好。4种回收率在85·3%~95·4%之间,检测限NE为0·083ng/ml、E为0·51ng/ml、DA为0·046ng/ml、5-HT为0·078ng/ml,线性范围NE在1·0~100ng/ml之间、E为5·0~80ng/m之间、DA为1·0~80ng/ml之间、5-HT为1·0~60ng/ml之间,相关系数在0·996~0·999之间。结论该方法为单胺类递质的神经毒理学、药理学等研究提供了一个简单灵敏、稳定可靠的方法。

结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达及鉴定

目的构建结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达载体并进行表达,为进一步研究奠定基础。方法PCR扩增Rv2994基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT获得重组表达质粒pGEX-2994,转化大肠杆菌测序后诱导表达,纯化目的蛋白并免疫新西兰大白兔获取多价抗体。结果从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Rv2994基因,成功构建了融合表达质粒pGEX-Rv2994,转化大肠杆菌JM109后,经IPTG诱导,表达出约73kDa重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的抗体。结论成功构建了原核表达载体pGEX-2994,获得并纯化了GST-Rv2994融合蛋白,制备了高效价的多价血清,为Rv2994基因的功能研究奠定了基础。

神经母细胞瘤患儿尿中儿茶酚胺含量的HPLC测定

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定尿中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)三种儿茶酚胺类物质的方法,为临床确诊神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)提供诊断手段。方法利用高效液相色谱及荧光检测器,采用Zorbax SB-Aq-C18(4·6mm×150mm,5μm)色谱柱,使用0·02mol/L KH2PO4溶液为流动相,对正常儿童和神经母细胞瘤患儿24h尿中NE、E和DA进行测定。结果NE、E和DA的日内精密度分别为5·46%、3·96%、4·49%,日间精密度分别为6·48%、4·67%、5·43%。NE、E和DA低、中、高3种浓度加标回收率分别为92·20%~94·38%、94·60%~95·85%、88·43%~91·68%。NE、E的线性范围为25~800μg/L、DA的为50~1600μg/L。最低检测限分别为2·5、1·5、0·5μg/L。结论建立的方法精密度好、准确度高、特异性强,适用于临床神经母细胞瘤的诊断。

西流湖水体藻类污染现状和产毒蓝藻的全细胞PCR检测

目的了解西流湖水体浮游藻类尤其是产毒蓝藻的污染现状,并建立全细胞PCR检测产毒蓝藻的方法。方法从2004年3月开始,采集西流湖水体表层水样,用血细胞计数板法计数藻细胞;设计特异引物,采用全细胞PCR方法检测水样中藻青蛋白基因中间序列(PC-IGS)和微囊藻毒素多肽合成酶基因mcyB,并对mcyB扩增产物克隆测序。结果西流湖水体藻类主要是蓝藻、绿藻、硅藻和裸藻,夏秋季蓝藻为优势藻门;2004年7月7日~9月27日水样PC-IGS序列PCR检测阳性,7月29日~9月27日水样mcyB基因PCR检测阳性,扩增片断mcyB测序结果与Genbank报道的铜绿微囊藻mcyB同源性大于97%,氨基酸序列同源性大于94%。结论西流湖夏秋季有产毒蓝藻出现,全细胞PCR法可以检测水体中产毒蓝藻。

水源水有机物低剂量混合暴露的雌/雄激素效应

目的研究水源水中有机物低剂量混合暴露对整体动物的雌/雄激素效应。方法利用固相萃取(SPE)富集水中有机物,借鉴美国环保局(EPA)推荐的子宫增重和雄/抗雄激素实验方法,检测人体日常饮用水量水平的有机物暴露所产生的雌/雄激素效应。结果日常饮水量的水源水有机物暴露的实验组与阴性对照组子宫重量变化及雄大鼠副性重量变化均无统计学差异,但4·0L/60kg组子宫上皮细胞高度明显高于阴性对照。结论人类日饮水量体积内所含的有机物混合暴露,未能在整体动物中检测到雄/抗雄激素效应,但可能有潜在雌激素干扰效应。

用tk基因突变试验评价长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性

目的评价有丝分裂抑制剂长春新碱和秋水仙碱的遗传毒性,并比较短期和长期tk基因突变试验的检出灵敏度。方法用长春新碱和秋水仙碱对小鼠淋巴瘤细胞分别进行3h及24h染毒,用微孔板法进行tk基因突变试验,计算相对悬浮生长、接种效率、相对存活率、相对总生长及突变频率等指标,并比较短期和长期处理的结果。结果两种受试物3h处理均未出现明显的阳性反应,而24h连续处理后,两种受试物均能诱导tk基因突变频率增高,诱发突变频率分别为自发突变频率的1·6~4·8倍和2·1~6·2倍,呈阳性结果。结论长春新碱和秋水仙碱在长期处理试验中能诱导tk基因突变,而在短期处理试验中未发现明显诱变性,即长期处理能提高tk基因突变试验的检出灵敏度。

儿童维生素A与铁营养状况的相关性研究

目的了解中国儿童维生素A(VA)的营养状况、VA缺乏率、VA边缘缺乏率,研究血浆VA与铁营养状况的相关性。方法由2002年“中国居民营养与健康状况调查”的大样本中随机抽取380名3~12岁儿童,检测血浆VA含量,同时测定血红蛋白(Hb)、总铁结合力(TIBC)、铁蛋白(SF)及转铁蛋白受体(sTfR)。了解儿童VA营养状况,计算VA缺乏率、VA边缘缺乏率,研究VA与铁营养状况评价指标的相关性。结果受试儿童VA平均含量为(1·03±0·24)μmol/L,其中8·4%儿童VA缺乏,44·7%儿童VA边缘缺乏。血浆VA与Hb呈正相关(r=0·16986,P<0·01),与sTfR呈负相关(r=-0·12863,P<0·05),与TIBC、SF不相关。结论铁缺乏伴随VA边缘缺乏在中国儿童中普遍存在,VA与铁营养状况存在相关性。

中链脂肪酸对营养性肥胖大鼠体重及脂质代谢的作用

目的研究中链脂肪酸(MCFA)对营养性肥胖大鼠体重、体脂和血脂水平的影响。方法采用预防肥胖模型法,每天给予SD大鼠高脂营养饲料,并灌胃含不同剂量MCFA的食用油脂,饲养38天,观察体重、摄食量、体脂重量、血脂、胰岛素水平在不同剂量组动物间的差异。结果高、中、低三个剂量组大鼠分别摄入0·975、0·325和0·163g/kg bw MCFA38天,高剂量组与模型对照组相比,体重明显较低[分别(295·2±29·7)g和(324·6±9·1)g](P<0·05),脂肪垫重量明显较轻[分别(5·30±1·57)g和(7·20±1·74)g](P<0·05),脂肪细胞明显较小;各剂量组总的摄食量不显著低于模型对照组;血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素水平与模型对照组比较差异无显著性,中、高剂量组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于模型对照组[分别(0·71±0·11)mmol/L、(0·73±0·12)mmol/L、(0·60±0·06)mmol/L](P<0·05),高剂量组大鼠的瘦素水平显著低于模型对照组[分别(1·61±0·39)ng/ml和(2·04±0·46)ng/ml](P<0·05)。结论在饲料摄入量没有差别的前提下,摄入0·975g/kg bw MCFA对营养性肥胖大鼠的体重增长有一定抑制作用,对血脂水平没有不良影响。

高碘对仔鼠脑甲状腺激素的影响及硒的干预作用

目的研究高碘摄入对小鼠仔鼠脑组织甲状腺激素的影响及硒的干预作用。方法将60只Balb/c小鼠随机分为4个不同的饮水组:正常对照组、高碘组(3000μg/L)、单独补硒组(200μg/L)、高碘加硒组(I3000μg/L+Se200μg/L)。喂养4个月时,雌雄交配。测定14和28日龄仔鼠血清TSH和甲状腺激素水平以及0、14和28日龄仔鼠大脑组织甲状腺激素水平。结果14日龄仔鼠高碘组血清TT4水平显著低于对照组和高碘加硒组,而TSH水平显著高于对照组和高碘加硒组(P<0·05),高碘组0和14日龄仔鼠脑组织甲状腺激素含量显著低于对照组、单独补硒组和高碘补硒组(P<0·05),28日龄仔鼠血清和脑组织甲状腺激素含量各组间差异无统计学意义。结论补硒能缓解高碘所致仔鼠脑组织甲状腺激素的改变。

2003年中国食源性疾病暴发的监测资料分析

目的持续监测国家食源性疾病监测网覆盖地区人群食源性疾病发生状况。方法对2003年监测地区13个省上报食源性疾病资料进行回顾性分析。结果2003年共上报802起食源性疾病事件,涉及患者人数达17462人。微生物引起的食源性疾病事件和涉及人数最多,分别占总体的46·4%和60·4%,其中副溶血性弧菌(40·1%)是主要致病菌。化学物引起的食源性疾病事件和涉及人数分别占总体的24·1%和13·9%。结论应不断完善中国食源性疾病监测网络建设,作为监测食源性疾病的重要平台。

人天然Fab段噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

目的构建人天然Fab段噬菌体抗体库,建立人源抗体制备技术平台,为恶性肿瘤的免疫治疗提供新方法。方法从一个健康献血员取200ml新鲜血液,分离淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增抗体轻链和重链Fd段cDNA,依次将PCR产物插入载体pComb3相应位点,电穿孔转化感受态大肠杆菌XL1-Blue,加入辅助噬菌体VCSM13产生噬菌体抗体库,酶切和PCR鉴定有无插入片段,用白蛋白和IL-2作为抗原进行筛选富集。结果部分重链Fd片段、部分κ轻链和λ轻链cDNA得到扩增。Fab表达库容达约1·2×106,酶切和PCR显示有插入片段。用不同蛋白进行几轮筛选,抗体库得到了不同程度的富集。结论本研究构建的人天然Fab段噬菌体抗体库可为进一步筛选特异性抗体,用于免疫治疗打下基础。

中小学教师职业紧张干预研究

目的评价中小学教师的职业紧张和工作能力状况,采取有针对性的综合干预措施,以便降低他们的职业紧张水平并提高工作能力,同时评价干预效果。方法采用整群随机抽样的方法选择四川省某市的9所中小学学校,以其中5个学校为干预组,其他4个学校为对照组,对该9所学校的教师进行职业紧张程度的调查和工作能力的检测,对干预组教师进行职业紧张的健康教育等综合措施,1年后以同样量表对该两组教师再次进行问卷调查和测量,从而评价干预效果。结果(1)干预后在职业任务问卷6个子项中,干预组教师的任务过重、任务冲突、责任感和工作环境4个子项得分较干预前降低,差异有统计学意义(P<0·05),且干预后任务过重、任务冲突和工作环境3个子项平均得分也低于对照组教师,差异有统计学意义(P<0·05);(2)干预后在个体紧张反应问卷4个子项中,干预组教师的人际紧张反应子项得分在干预后显著降低(P<0·05),且业务紧张反应和人际紧张反应2个子项的平均得分也低于对照组,差异有统计学意义(P<0·05);(3)干预后在个体应对资源问卷4个子项中,干预组教师在娱乐休闲、自我保健和理性处事3个子项上的平均得分显著高于干预前水平和对照组教师,差异均有统计学意义(P<0·05);(4)干预后,干预组教师的工作能力得分显著高于干预前和对照组教师(P<0·05)。结论干预措施能够有效降低中小学教师的职业紧张程度,缓解紧张反应,增强应对紧张的能力并提高他们的工作能力。

广东省梅州市生活饮用水水源卫生状况调查报告

目的查清广东省梅州各市、县(市、区)农村饮水卫生现状,为改水防病提供科学依据。方法选取有代表性水源为调查对象,以村为单位,抽查3个饮用水源,其中1个集中式供水水源,2个分散式供水水源;水质检测方法,按《生活饮用水标准检验方法》检验。结果梅州市共抽查1929个村(占91·9%),4183个水源;调查饮用水人数约250万(占51·3%)。集中式供水水质合格率为59·1%,分散式供水水质合格率为75·8%,其中手摇泵井水水质合格率为83·1%,井水水质合格率为70·3%,泉水水质合格率为69·7%,地面水(包括河水、水库水、沟水、塘水)合格率为56·4%。结论县级自来水水源水质都符合国家卫生要求,合格率100·0%;乡镇级饮用水源水质较差,合格率61·0%,要加强农村乡镇级饮用水水源卫生保护措施,提高镇级饮用水质卫生合格率。

电感耦合等离子体发射光谱法测定奶粉中的9种元素

目的探讨用电感耦合等离子体发射光谱法测定奶粉中钙、铁、锌、钠、钾、镁、铜、锰、磷9种元素的含量。方法用微波消解法处理奶粉样品,然后运用电感耦合等离子体发射光谱法分析样品,同时探讨了最佳消解奶粉样品和分析样品的条件。结果电感耦合等离子体发射光谱法测定中9种元素的方法检出限为0·05~50mg/kg,相对标准偏差为0·3%~4·5%,加标回收率为91·0%~105·8%。结论该方法具有操作简便、反应彻底、多种元素同时测定、检出限低、线性范围宽、干扰小等优点,并具有良好的准确度和精密度,适合奶粉中微量元素和常量元素的测定。

反相高效液相色谱法测定罗哌卡因在犬血浆中的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定犬血浆罗哌卡因浓度的快速、简便的方法。方法色谱柱为Intertsil C18柱(4·6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水相,体积比为50∶50,水相为0·005mol/L己烷基磺酸钠,冰醋酸调节pH至3·5,检测波长为215nm,流速为:1·4ml/min;柱温为室温;柱压为2800PSI,进样体积为10μl,灵敏度为0·02AUFS。结果罗哌卡因的检测浓度线性范围为0·1~25μg/ml(r=0·9992),最低检测浓度为0·05μg/ml,回归方程为^Y=0·1794X+0·3806,相关系数为r=0·9992,回收率为91·2%~93·6%,RSD为2·10%~3·40%。罗哌卡因测定的日内及日间精密度分别为1·35%~2·88%和1·80%~3·76%。结论本法操作简便、可靠、快捷、准确,适用于罗哌卡因类药物给药后血药浓度的检测。

餐后血糖应答反应的影响因素及其调控

血糖水平异常,是许多慢性病的常见特点和危险因素。血糖生成指数(GI)是反映碳水化合物餐后血糖应答水平的特征性指数。测定各类碳水化合物的血糖生成指数之后,用来指导人们的日常膳食,改善糖尿病人、心脑血管病病人和肥胖者等的健康状况,具有重要的意义。现有的证据表明,影响食物血糖应答的因素很多,包括食物本身所具有的各种特征和机体自身的状态等。对这些因素的认识,有助于更有效的推广和应用GI来指导人们的膳食,维护和改善人们,尤其是糖尿病和肥胖等慢性疾病患者的健康。本文综述了碳水化合物的消化吸收和利用过程中影响血糖应答的各种因素及其机理。

环境镉污染人群健康影响研究回顾

以人群调查研究资料为基础,从人群镉暴露的研究方法和暴露水平、人群的靶器官损害及早期敏感监测指标的研究进展、镉暴露对人群疾病与死亡的影响、环境人群健康危害监测等方面,对环境镉污染人群健康危害的研究现状进行了回顾。

微囊藻毒素及其毒性研究进展

微囊藻毒素是富营养化淡水水体中最常见的藻类毒素,它是一类具有多种异构体的环状多肽物质。由于其毒性大、分布广,从而成为水环境中的重要潜在危害物质。作者总结了微囊藻毒素的分子结构、理化性质及污染现状,并综述了有关其毒性及作用机理的国内外最新研究进展。

水质毒性分析荧光仪检测水中毒性物质的应用

水质毒性分析荧光仪(ToxY-PAM)是近年来出现的一种新型双通道叶绿素荧光仪,以单胞藻类为指示生物,利用水中毒性物质直接或间接抑制藻类光合活性的特点,对水中的毒性物质进行快速、敏感的生物检测。本文就水中毒性物质的荧光检测技术的发展历程、ToxY-PAM的基本原理及其测试过程等方面作了简要的综述。